熒光定量PCR的效率值

熒光定量PCR的效率值可通過標準曲線獲取。理想的反應效率為100%。效率較高（高于110%）一般說明反應過程中存在抑制作用。引起抑制作用的原因主要是RAN或者DNA質量較差，模板濃度過高及含有核酸鈍化的殘余物。反應效率較低（低于90%）的原因有試劑濃度不適（主要是引物、鎂、Taq 、 DNA、聚合酶、尤其是在多重試驗中）。造成效率低的其他因素有引物  T  m之間的差異超過5℃或者是熱循環條件不適。抑制作用和較低的效率會影響分析的靈敏度，導致動態范圍減小及通用性降低。怎樣解決呢？可在做凍干時降低模板濃度，優化工藝曲線等。試劑凍干機Pilot7-12T提供對藥品、診斷試劑、蛋白、多肽、酶、抗體、抗原等進行凍干工藝優化，包括保護劑篩選、凍干曲線優化、凍干穩定性測試、凍干生產工藝設計等。